Как вы уже знаете, существует две формы материи:
живая и неживая.
Сходство материй и их различие можно выявить, сравнив обменные процессы с окружающей средой:
Обмен веществ
:
1) В неживой природе: обмен веществ ведет к разрушению (диссимиляции),
2) В живой природе: обмен веществ ведет к созиданию (ассимиляции).
Энергообмен
:
1) В неживой природе – динамическое равновесие,
2) В живой природе – нет динамического равновесия.
Согревание бутылочки в теплой воде: согрели, на этом и закончилось.
Человек на морозе на улице, если их температуры уравновесятся, то человек умрет. В этом отличие. Часть энергии тратится на постоянство внутренней среды.
Информационный обмен :
1) В неживой природе: отражение пассивно
2) В живой природе – отражение активно
(Человек прошелся в рифленой обуви по песку (остался след) и по другому человеку).
Раздражимые системы
Организм животных и человека обладает высочайшей способностью приспосабливаться к постоянно меняющимся условиям внешней и внутренней среды. В основе приспособительных реакций организма лежит универсальное свойство живой ткани раздражимость.
Раздражимость
– способность активно отвечать на воздействие внешней и внутренней среды изменением обменных процессов.
Раздражимость характерна для всех биосистем (например, животные, растительные клетки). Раздражимость является эволюционно древней формой реагирования недифференцированных тканей. В процессе эволюции произошла постепенная дифференцировка тканей. Раздражимость в этих тканях достигла наивысшего выражения и получила название возбудимость. Т.е. возбудимость – частное проявление раздражимости.
Возбудимость
- способность ткани специализированно, целенаправленно отвечать на раздражение. Возбудимостью обладают нервная, мышечная и железистая ткани.
Возбуждение
– процесс, характеризующийся изменением обмена в ответ на раздражение в виде временной деполяризации мембраны. Ответной реакцией нервной клетки может быть проведение нервного импульса, мышечной клетки – сокращение, секреторной – синтез и выделение биологически активного вещества.
Раздражитель
- это изменение внешней или внутренней среды организма, воспринимаемое клетками и вызывающее ответную р-цию.
Компоненты возбуждения:
- Химический
- Физико-химический
- Физический
- Физиологический
Физико-химический
– ионная проницаемость (будем изучать).
Физический
– электрические, термические, механические проявления.
Физиологический
– изменение функциональных свойств (например, клетка может утратить возбудимость во время возбуждения).
Электрическое проявление – наиболее значимое для возбуждения. Регистрируется в виде быстрого колебания мембранного потенциала или потенциала действия. Таким образом, возбудимость – способность генерации потенциала действия (ПД), а возбуждение – процесс генерации ПД.
Эксперименты
1-вый экс. Гальвани
доказал существование мех-тока му 2-мя разнородными металлами он раздражал и ткань и мыш препарата что приводило к сокращению мышц.
2-ой экс. Гальвани
доказал существование животн электричества. Г. Не Имел инструментов, приборов, не мог измерить эл ток ни его направление эл тока – любое направление дв заряжены частиц. Биоэлектрич явл в тк – это направление дв ионов.(Рис.1)
Эл между повр и неповр участком наз током покоя или током повреждения.
Наруж. Поверхность возбу тк заряжен + а изнутри – при поврежд происх сменно + на – (Рис. 2)
Маттеучи
прод эксп Гальвани взял 2 нерв-мыш(Рис.3) препарат и стал раздражать нерв 1 препарата, а 2 препарат был положен на мышц 1 препарата. Было доказано наличие тока действия му возбужденным участком кот явл мышца и нвозб участком кот явл нерв.
Эти токи обусловлены разницей потенциалов му наружней и внутренней поверхностью мембран. Эту разницу назвали МПП а молекул механизм наличия разгадали Ходжкин, Хаксли, Катц (1949-1952).
Эта теория была основана на знание о молекул строении мембран. Суть этой теории МПП возник благадаря направленному движению ионов чз мембраны, причем в основном это направлен движение обусловлено движению ионов К +
Движению ионов К +
чз мембрану переопределено след положениям
1. Сущ-е эл хим градиета для К Na и Cl .
2. Избирательно высокий проницаемости мембрану
3. Наличие акт транспорта ( Na K атфазы в мембране)
Мембрана
Билипидный слой, в кот мозаично плавают белки.
Интергративные белки выполняют ф-цию каналов, переносчиков, насосов, рецепторов.
Периферические белки форм-ют: -цитоскелет –гликокаликс(Рис.4)
Транспорт веществ через мембрану
1диффузия
2осмос
3активный
4везикулярный
1Диффузия
1простая
2облегченная
Простая
- две частиц ч/з мембрану по хим. контрационному градиенту (из обл. с высоким [] в обл. с низкого [] в-в.) липид раствор в-ва (О 2
;СО 2
этанол и др.) легко диффундируют ч/з липидный бислой, а водорастворимые в-ва и Н 2
О но могут, а могут ч/з водн. каналы, формируем спец трансмембр белками, кот. наз. транслокамембр, поэтому все ионы диффуидир ч /з мембрану только ч/з каналы, потому что они еще покрыты гидратной оболочки, проходя ч/з канал отдают «шубку» гидратную, если он не отдал, то не может пройти.
Облегченная-
пассивн. перенос в-в с помощью спец белков-переносчиков по градиенту конц-ции.
2Осмос
-это пассивное движение мол-л Н 2
О ч/з мембрану по градиенту осмотического давления. Сила которая определяет движения Н 2
О называется осмотиеским давлением.
Осмотическое давление- обусловлено кол-вом раствор в Н 2
О частиц. Движение мол-л Н 2
О осущ-ся из облости с низкой конц-ции в-в в область с высокой конц-ции.
Часть осмотического давления который создает белки называющие онналическим давлением.
3Активный транспорт
-Первично активный (наличие белков комплексов-насосов, работа кот. связана с исп-ем энергии АТФ= транспорт АТФ- азы). Основные функция поддерживания градиента конц-ии ионов осущ. против градиента.
-Вторично активный (обеслеч транспорт в-в белками переносчиками против градиента конц-ции за счет энергии транспорта ионов N а по контрационному градиенту)подержание контрационному градиента N а, обеспе N а,К АТФаза
Чтобы перек углеводы, а/к-ты Са против град конц-ции переносчик.(Рис.5)
4Везикулярный транспорт
-с затратой энергии АТФ
–участие сократ белка цитоскелета
–Са
Эндоцитоз :
- пиноцитоз (Служит поглощение небольших капелек раствора в-в, белков, холестерола)
- фагоцитоз (Служит поглощение крупных частиц, бактерии, разрушенные кл.)
Экзоцитоз :
выделение в-в из кл. (синтез и выделение гормонов,пищеварительных ферментов)
Происхождение МПП
При созд-ии МПП важную роль играет процессы простой диффузии ч/з белковые каналы и первично активный транспорт.В основном создание МПП принимает участие диффузии К из внутриклеточной среды во внеклеточное, такое доминирование К в возбуд с-мах предопределено след факторами.
1Электрохимический градиент ионов К, N а, С l .
2Избирательно высокая прониц мембраны для К.
3Наличие акт транспорта в мембране т.е. N а,К, АТФазы.
1Электронохим градиент(рис.6)
-
это соотношкние + и – заряженных частиц внутриклеточной и снаружи.
Изучая проницаемости ионов ч/з мембрану явл токи К.
МПП- равновесн около 90 мВ, но если бы это было около 70 мВ (потому что МПП- это сума величин, опред вклад в кот вносят ионы N а и Cl + работа электрогенного насоса Na - K АТФазы)
Работа электрогенного насоса вносит 10мВ.
2Избират высокая проницаимость мембран д/ионов К
На мембране существует для транспорта ионов существует специальные каналы определяющие мембраны для транспорта ионов.
(рис 7)Простой не управл канал образующий пору в мембрану(каналами утечки, а токи ч/з эти каналы токи утечки). Ничего не мешает пройти К ч/з этот канал. Этот канал образует высокий спец каналы опред-щие избирательно мембраны д/транспорта ионов.
Высок спец избират канала устье опред диаметра и опред заряжен отрицательно гр на внутр стенках канала поэтому ион К имеют гидрати оболочку, отдает гидратн оболочку. Ион N а не может пройти т.к. имеет меньше диаметр, но имеет 2 гидр оболочку.
(рис 8)воротн. механизм- особачувствует участки белка( n ) с высокой чувствительно к чум-ю заряда на мембране. В покое эти каналы закрыты в одноворот канале имеются только 1 управл ворота( n )
(рис 9)управл двуворотн д/ N а
m -активацион ворота(закрыты,поэтому тока нет) n - инактивацион ворота в состоян-покоя (открыт)
(рис 10)наличие N а К АТФаза, кот работает постоянно. N а может проскочить в открыт канала д/К (утечка)
Ионные каналы
1Управляемые:
-Электрогенные потенциал чувств(взависимости от заряда на мембр.)
-Лиганд зависимые(в зависимые какое количество + рец.запускает ряд реакций) 1одноворотные(К) 2двуворотные( N а)
-механочувствительные (открыв,закрыв при растяжении мембраны)
2Неуправляемые(каналы утечки)
Методы Регистрации МПП
1обнаружить наличие МПП можно с помощью 2 опыта Гальвани, а вот измерить Мпп можно только с помощью микроэлектродной техники.(рис 11,12,13)
Екр-критич потенциал(критич уровень деполяризации при достижении кот. на мембране)
Ео-нач зн Мпп быстрая деполяризация или ПД
Разница м/у Ео и Екр наз (Ео-Екр)порог деполяризации или пороговым потенциалом, явл хар-кой мембраны и опр-ет возбудимость мембраны явл мерой возбудимости. ∆Е=Ео-Екр.
Чем меньше ∆Е, тем выше возбудимость.(рис 14)
ПД приближается к равновесному N а потенциалу, потому происходит изменение знака заряда.
«Все или нечего»т.к. амплитуда ПД не зависит от силы St если St >порогов величины (з-н про ответ возбуд кл на раздр-е)
1фаза деполяризации( N а дв внутрь кл)
2фаза реполяризации(К из кл)
3фаза Отриц след потенциала деполяризации
4фаза след гиперполяризации
Депол. развив потому что при изменении заряда на мембрану срабатывают m -активации ворота N а каналов, кот начин открыв и канал ионов открытым. Чем больше открытых каналов, тем больше потенциал(система начинает работать по принципу + обратн связи, т.е. возник регенеративная камоусилив) депол.
Ревереля
Потомучто открыв N а каналы а + ион N а устремл внутрь клетк ток начин доминир К из клетки→перезарядка мембраны.
1фаза деполяризации
Абсол величина +100-120 мВ
Перелом
При достиж +30 начин сраб h инактивацион ворота канала д/ N а они очень медленны
Иннактивация канала
( Na , проходя ч/з открыт инактив вороты, не могут пройти + 30прекращ ток N а)
Во время реполяризации усил ток К из клетки, т.к. мах открыв дополнит одноворотн К-каналы, т.о. сдерживают вос-е исх. уровня потенциал покоя.
2фаза след потенциалов.
4,3 за счет работ смертных K одноворотн каналов и сущ-я повышен тока K из кл форм-ся 3и4 фазы,наз-ся следовые потенциалы.
3фаза след деполяризации(отрицательный след потенциала)
4фаза след гиперполяризации(положительный след потенциала)
2-е условие возник-е возб-е – это достаточн уровень параметров раздр-я
Св-ва раздра-ля
1сила
2время
3градиент нарастания силы во времени
Min сила раздр-ля, способная вызывать возбуж-е, наз порогом разражения
-подпорог
-порогов
-сверхпорог
(рис 15)
St <50% порог- на мембр развитии пассивн деполяризация (электротон)=электротонич эффектом.
50%< St <100% порога – акт деполяризации но несмотря на откр-е N а каналов все не откр-ся –это наз локальн ответ.
Локальн ответ в отличии от ПД.
1не распр-ся вдоль
2явл градуальным (его амплитуда зависит от силы раздражителя)
Мерой возбудимости можно считать и порог разр-я(это хар-ка раздр-ля)
М/у t действия разд-ля и силой сущ-ет зависимость, кот наз сила-длительность и имеет форму гиперболы.
(Кривая Гоорвейча Веиса-Лапика)(рис 16)
АВ- min f деиств раздр-ля, кот через опр t может вызвать возбуждение;порог величина реобаза.
АС- min t , необходим д/возник-я возбуждения при действии разд-ля с силой 1 реобаза
АД- t , необх д/вызывания возб-я абсолютн порог t .
Исп-е в клинике
: исп токов высок ʋ, но подпорог t →температ эффект
АЕ- 2 реобазы д/точности
А F - t , отражающие возможность отражения действия 2 реобазы
Хронаксия- t действие разд-ля необходим д/возникновения возб-я при действии силы реобазы.
Чем больше Хронаксия тем меньше возбудимость.
4-самая возбудимая
Прибор, измеряющиеся хронаксию называют хронаксиметр.
Градиент нарастания силы во времени
(рис 17)
Быстрое нарастание силы во времени, постепенное действие(нарастание)
При min градиенте нарастании силы во t ПД может не возникнуть,развив-ся только лок ответ.
Понижение возб-ти ткани и амплитуды ПД при медленно нарастающим St на аккамодацией. В ее основе лежат процессы инактивации N а каналов и повышении проницаемости для К каналов. Разд-ль постоян неизмен величины вообще не вызывает раздр-я( const Y м/у моментами вкл и выкл возбуждения).
Действия пост тока на ткань
Осущ-ся α типами:
1Физиологический (т.е. эл ток явл фактором, кот изменяет функцию состояние возб ткани т.е изменение возб-ть)
2раздражающие действие (пост ток выступ как раздр-ль)
Физиол действие постоянного тока
При кратковременном действии подпорогового пост тока под электродами изм-ся воз-ть ткани, т.е что: под катодом возб-ть повышается (и наз это KAT -электротон) а под анодом сниж-ся (и это наз АН электротон) это связано с тем что катод имеет избыток «-» заряд, поэтому. «+» заряд на наруж поверхности мембраны под катодом неск уменьш,то Мпп уменьшится, а любое уменьшение трансмембран разницы приводят к деполяризации (пассивной) электротон.(рис 18)
Анод с недостат «-», избыток «+» Наружн мембр будет иметь больше зн + заряда, разница потенцилов м/у наруж у внутр мембраной увеличивается.(рис 19)
Снижение возб-ти, можно действ Катодом длительн время на мембране производит процессы аккомодации, изм-ся уровень критич уровень деполяризации, поэтому увелит-ся порог потенциал и возб-ть мембраны резко снизится.
При длит действии под анодом произ процессы аккомодации, критич уровень депол-ции изм-ся в сторону гиперполяризации и на мембране уменьшается порогпотенциал,что приведет к повышению возбудимости.
Особ-ти раздр действие постоянного тока:
Хаар-ся поляриз-ном, содерж полож-ями
1раздр действия пост тока оказывает либо в момент замыкания или размыкания эл цепи
2при замыкании разд действия проявл-ся только под катодом ,при размыкании только под анодом
3катодозамыкательн эффект больше чем анодоразмык эффект
Под анодом при размыкании цепи исчезает гиперполяризация и достиг новый уровень критич депол-ции, возник ПД.
Факторы влияющ на хар-р ответ р-ции возб биосистемы:
1параметры раздражителя(сила,время,градиент нарастания силы во времени)
2Функцион состояние мембраны
Биосистема(н/р кл тк орган)
Хаар-р влияния на ответ р-ции параметров раздр-ля описывается 3-мя законами раздр-я:
1закон силы
2закон времени
3закон градиента развития силы во времени
Клетка(рис20)
При действии раздражителя порог силы достигается критич уровень деполяризации и открыв все N а каналы амплитуда ПД будет const т.е. з-н силы д/кл подчин з-ну «все или ничего» зн нараст град силы во времени(рис 22)
При п/п град нара силы во на мембране происходят процессы аккомодации, увел порог потенциала и возб-е не наступает,следует при наруш сил вот ответ р-ции.
При п зн град-та будет достигнут критич уровень депол-ции и возникает ответ р-ции опред амплитуды.
При с/п: при увел-е град-та увелич-ся кол-во открыв N а каналов при увеличении нарастании, и ответ р-ции растет.
При max градиенте нарастания УП мы получ max ответ кл.
Ткань(рис 21)каждая кл в тк имеет собственный порог возбудимости, поэтому когда мы берем порог знач-я возб-ся только самые возбудим кл и при увел с/п в конце концов возбуд-ся все.
З-н силы д/тк работает по принципу силовые отношения.Чем больше У тем больше ответ р-ция
д/того чтобы биосистема была возбуждена необходимо,чтобы все 3 закона вместе работали одновременно. Если один из них не работает, то возб-е не наступит.
д/облегчения инъекции можно обойти з-н (очень быстро)
д/инъекций глобулина собл-ть з-н градиента т.е. делать очень медленно, без рывков.
Закон градиента д/кл и д/ткодинаков.
В процессевозбудимости происх-т функции состояние биосистемы, т.е. изменяется возбудимость.(рис 23)
1фаза абсолютн рефлекторности(причина открытия и быстрая инактивация N а каналов)
В процессе репол-циипроисходит воостановленна возб-ти биосистемы и сна наз.
2фаза относит рефлектор-ти (часть N а каналов уже закрыта, а это означает, что они могут откр-ся при действии с/п раздр-лей)
При след депол-ции порог потенциал ∆Е меньше, чем в их состоянии, а значит возб-ть повышена и наз-ся эта фаза повыш возб-ти
3 фаза супернормальной возбудимости= фаза экзальтации. Даже п/п разд-ль выз-ет возб-е.
В фазу гиперпол-ции ∆Е значительно больше чем в исходном состоянии следует возб-ть снижена.
4фаза субнорм возб-ти(рис 24)
Не только во время одиночного разд-я, но и при частот разд-я меняется функцион св-в биосистемы. Выд-ют частоты кот улучшают функцион состояние биосистемой они наз аптимальными,а кот ухудшают- пессимальные.(рис 25)
St попал 6 период отн.реф-ти
St 2 попадает в фазу нормальной воз-ти
St 3 пришелся на фазу экзальтации, т.е. эта точка считается исходной уровням воз=ти на мембране и форм-ется новый процесс возб-е
Общие св-ва возбудимости систем
1возбудимость
2лабильность
3проводимость
Мерой воз-ти явл след хар-ки
1порог раздражения(т.е. порог силы Т, градиента нараст-я силы во Т)-это явл хар-кой раз-ля
2хроноксия (хар-ка раздражителя)
3порогов потенциалов ∆Е это хар-кА биосистемы мембраны
4лабильность (хар-ка мембраны или биосистемы)
Впервые ввел понятие лабильности Введенский
Лабильность-это функцион подвижность возбд тк(введенский)
Лабильность-это способность биосистемы в течении определенного времени развертывать одиночный процесс возбудимости.
Мерой лабильности явл max число возб-ний или ПД, кот способна генерировать возбудимая с-ма за единицу времени в связи навязанным ритмом возбуждения.
Лабильность изм-ся в Гц.
Нервные волокна-1000Гц(н.волокно может повторить ритмы стимулирую в 1000Гц, генерирует 1000 импульсов в С, т.к. абсолютно рефлекс=1мс)
Чем выш лабильность, тем выше возб-ть.
Физиология нервных проводников.
Н.волокна- отросток нейрона или неск, заключенных в глиальн оболочку.
Совокупность н.волокон обр-ет н.пучки, а.н.пучки форм-ют н.ствол или нерв.
Виды н.волокон
1немиелинезированные(безмякотные)
2миелинизированные(мяготью)
Миелинизированые волокна образуют в результате погруж
Обр-ся засчет погружения аксона в клетке кот многократно оборачивается вокруг н.волокна.
Миелин-многослойный структура представлен мембранами олигодендроциты или Шванн кл и обл-е большими изолированными св-вами.(рис 26)
Скорость провидения н.импульса по н. волочки:
1толщины
2наличие миелиновой оболочки
Аα первичные аференты мыш веретен, двигательное волокна склетн
Аβ сенсорные кожные афференты
Аγ двигательные волокна мыш веретен
Механизм провидения
Возб-е в н.волокнах распр-ся поср-вам эл-тонической связи от возбудимого участка мембраны к невоб.участку, при этом проведение импульса м.б. непрерывное и сальтоторное. При непрерывном проведения возб-е соседние участка повтор-ся многократно на вселе протяжении немиелинизир н.волокна, в каждый его точке.(рис 27)
Ток возникающий м/у возб и невозб участками приводит электротонически к депол-ции, возб-е соседнего участка следует распр-е.
Пассивная деполяризация чередуется с активной депол-цией.
Электроный тоничный ток открывает N а каналы.
Локализуется ответ не расспр-ся без потерь энергии.
В миелиновых оболочках в местах перехвата Р,разделенный с предыдущим миелиновой оболочкой, т.е. возб-е совершает скачек от одного перехвата к другому, при этом это называется сальтоторным= скачкообразным.(иногда возможет скочек ч/з 2-3 переж) высокая скорость, высокоэкономичным.
Болезни нарушения миелин-ции(рассеянный склероз)
З-ны проведения возб-я в н.волокнах
1з-н двухстороннего проведения(расп-е возб-я набл-ся в обе стороны от нанесения St «разд-ля»)(рис 28)
Н.волокна афферентные волокна следует обусл.сущ-е аксон-рефлексов.
Синапс проводит возб-е в 1 ситерону(от аф.пути к эф.пути)Однонаправленная передача.
2з-н анатомичный и физиол целостности.
Функ.целостность.Наруш-е провед-я по нервам это дейсивие фарм препаратор(блок N а каналы),охлаж-е, приводящ.к снижению метаболизма;факторы снижения возб-то мембраны.
Все эти возд-я временны; после их отмены пров-е по н.восст-ся.(н/р новокаин блок-ет N а каналы, длит.депол-ция приводит к увелич потенциала и снижению возб-ти пессим. Скорость увеличивается абсол.рефо.пенеод и снижению воз-ти в н.
3Изолиров проведение
В составе н.возб-е по н.волокнам проводится изолированно, без передачи на соседн.волокна не может депол-ть мембрану соседн н.волокна, хотя эл-тонически это возможно (изм-е заряда на сосед волокна, т.е. на нем увелич-ся возб-ть, и даже подпорог может его возб-ть)
4з-н бездекрементного проведения(без затухания)
Т.е. ПД имеет туже самую амплитуду в начале и в конце (ога не меняется на всей протяженности)Н.волокно пассивно проводит возб-е не трансформируя его.
Физиологии мышц
Скелетные мышцы состоят из мышечных волокон, м.волокно- это многоядерная обр-е, кот имеет:
1плазменую мембрану имеет инвагинации в виде поперечной трубочек)
2Саркоплазм ретикулом(СПР),кот.обр-ет продольный стимул трубочек
3миофибриллы, кот об-ют сократ.аппарат мышц они распол-ны друг другу, при этом за счет разным, перекрывания обр-ют А-и И- диски, за счет и есть поперечно исчерченность всего волокна.
Каждый миофибрилла сост-т из миофиламентов, кот пред-ют собой тонкие нити белка актина и толстые теит белка мибрена.(рис 29)
Морфа функция единицей мышечных волокна явл саркомер.
Механизм эл-мех сопряжения(явл основой сокращения)
1возб-е мембраны мышечного волокна следует депол-ция сорколеммы(это эл часть эл-мех сопряжения.
2депол-ция приводит к открыванию Са каналов СПР и выход Са в цитоплазму.
3Са после выхода сад-ся с тропониним(глоб.белка).(рис 30)
Троломиозин (фибрилл.белок),кот лежит в желобке м/у нитями актина состоит из множества глобул.белков из 2 цепочек.
Б.тропомиозин закрывает акт сайты б.актина,когда Са соед-ся с трополином,он изменяет его ,это приводит к изменению положения тропомиозина,что приводит к откр-ю акт сайтов актина.
4мол-ла миозина состоит из хвостовой части, шейки и головки. Головка обл-ет 2-мя акт.сайтами один акт.сайт присоед-ся к акт сайту актина. Другой акт сайт, имеющ АТФазную активность на момент присоединения головки к актина несет пластично гидролизован мол-лу АТФ в виде АДФ. (рис 31)энергия не выделяется.
5как только соед-лись головка и актина произощел полный гидролиз АТФ, выд-ся энергия, кот привела к изменению положения головк относительно мол-лы на хвост.
Наступило сокращение
6изм-е конф-ции головки мимбрина и скольжение А и М относительно др к другу.
7новая мол-ла АТФ присоед-ся к головке мибрина, этого достаточно д/расоединения Аи М(пассивное)
Мышца расслаб-ль
Энергия АТФ тратит на 5 шаг расслаб-пассивно,но он энергозависим(Са каналы закрыв-энергии) Са-АТФаза в СПР
Контрактуры:
1избыток Са(движение)
2посмертн.окончение(нет АТФ д/расслаб-я)